Sistema de HPLC: Dicas práticas para problemas comuns

Olá! Aqui fizemos uma seleção dos principais problemas técnicos que ocorrem em um sistema de HPLC e elencamos possíveis causas e soluções. Confira!

Picos fantasmas

São sinais captados pelo seu detector em um ponto onde não deveria apresentar picos. Na maioria das situações ocorre devido a algum tipo de contaminação (água, solvente ou coluna). Lembre-se de utilizar somente solventes grau HPLC, água ultrapura e conservar a coluna conforme recomendado pelo fabricante. Além, claro, de realizar a filtração da fase móvel com uma membrana adequada. Normalmente uma lavagem no injetor resolve o problema, se permanecer, corra um solvente pela coluna, isso provavelmente removerá uma eventual contaminação.

Baixa resolução

Isso é comumente causado por dois principais motivos: Fase móvel contaminada ou coluna/pré-coluna obstruída. O primeiro passo é avaliar a validade e preparação da fase móvel. Realize a filtração por membrana e passagem por banho ultrassônico novamente, isso pode resolver o problema. Se permanecer, tente remover a pré-coluna e refazer a análise. Caso o problema persista, a coluna pode estar entupida. Realize sua lavagem ou utilize o processo de regeneração adequado. Se nada disso der certo, teste com outras colunas.

Pressão de trabalho elevada na coluna

Quando a pressão da coluna aumenta demasiadamente, podem ocorrer diversas distorções na análise. Isso ocorre, também, pelos motivos mencionados no tópico anterior (problema na fase móvel ou obstrução da coluna/pré-coluna). Teste os mesmos procedimentos sugeridos anteriormente. Se o problema persistir, pode ser que o problema esteja em alguma outra parte do sistema (bomba/injetor/tubulações). Realize os testes indicados pelo fabricante para tentar localizar a causa raiz.

Lembre-se, um preparo de amostras e fase móvel é parte chave para que o sistema funcione corretamente pelo máximo de tempo possível. Um investimento de tempo que economizará muito tempo e dinheiro. Filtre a amostra, filtre o solvente. Seu HPLC agradece!