Micropropagação – Ultrafiltração na esterilização dos reguladores de crescimento

Segundo a Embrapa, os reguladores termolábeis, utilizados no desenvolvimento de mudas micropropagadas (ou propagação vegetativa in vitro), para manterem sua integridade no meio de cultura, não devem ser esterilizados na autoclave, mas sim através do processo de ultrafiltração.

Regulador Peso molecular Esterilização recomendada
AIA – ácido indolil-3-acético 175,2 Ultrafiltração
Z – Zeatina 219,2 Ultrafiltração
GA3 – Ácido Giberelico 346,4 Ultrafiltração
ABA – Ácido Abcístico 264,3 Ultrafiltração

A solução deverá ser esterilizada através de um filtro com porosidade de 0,22µm, tamanho de poro suficiente para eliminar a imensa maioria dos contaminantes. Pequenos volumes de solução (10-20ml) devem ser carregados em uma seringa e passados pela unidade filtrante, comumente, considerando esse volume proposta, com 25mm de diâmetro. Após esse processo, a solução-estoque pode ser adicionada o meio de cultura devidamente autoclavado e resfriado (próximo aos 45 °C).

Filtro de seringa Filtrilo, com membrana em PTFE/L Hidrofílico - Poro:0.22(μm), Diâmetro:25(mm) - Não estéril

PTFE/L Hidrofílico

Linha Filtrilo para Ultrafiltração

Na linha da Filtrilo, o filtro compatível com o processo é o SFPTFE-2522H, pois possui membrana em PTFE Hidrofílico, com ampla resistência química e térmica.

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Manual completo Embrapa

Confira o manual completo, elaborado pela Embrapa, com as instruções completas:

https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/47132/1/Doc-61-A5.pdf